荧光染料又称为荧光探针, 因具备检测速度快、重复性好、用样量少、无辐射等优点，成为大家广泛使用的荧光标示剂。同时也是细胞生物学等科学研究中不可或缺的重要工具，利用荧光探针可测定RNA和DNA的结构、研究DNA碱基损伤修复、辨别蛋白质分子中氨基的状态和蛋白质分子的活性区, 检测pmol级的蛋白质 ,区分不同构象的核酸以及有关药物的化学反应活性。荧光免疫分析采用时间-分辨技术可用于许多蛋白质、激素、病毒抗原及DNA杂交体的分析。激光诱导荧光光谱在活细胞、活体体液、DNA碱基序列和细菌原体的鉴定、恶性肿瘤的早期诊断和治疗中起到了重要的作用。

由于大多数荧光染料不具备选择性，被固载在生物活性载体的荧光染料，可利用生物活性物质之间的选择性（抗原抗体，生物素链霉亲和素），或者通过染料分子用适当的修饰官能团，通过官能团之间的相互反应，实现对目标物质的靶向性标记，下面我们就来给大家介绍常见的几类活性荧光染料：

活性荧光素及其衍生物广泛用于共价标记生物分子，例如抗体，碳水化合物，核酸，蛋白质，肽和寡核苷酸。各活化官能团对应的反应基团如下：

琥珀酰亚胺酯（Succinimidyl esters）/ NHS酯-用于标记抗体，蛋白质，肽，胺修饰的寡核苷酸和其他生物分子上的游离氨基（-NH 2）

马来酰亚胺（Maleimides）-用于标记抗体，蛋白质和肽上的巯基

叠氮化物(Azides)-通过点击化学法（Click）标记乙烯基

炔烃(Alkynes)-通过点击化学方法标记叠氮化物

酰肼(Hydrazides)-用于标记醛基和酮基

羧酸(Carboxylic acids)-经碳二亚胺预活化后用于标记胺或用于醇的Steglich酯化

氨基(Amines)-具有游离氨基的荧光染料，用于与各种亲电子化合物（如活化的酯和环氧化物）偶联。

四嗪（Tetrazines）-通过反电子需求Diels-Alder反应标记反式环辛烯(TCO)，，环丙烯和其他活化的烯烃。

亚磷酰胺(Phosphoramidite)-亚磷酰胺标记的染料可用于标记寡核苷酸

环炔()-具有环炔基部分的染料可用于无铜点击化学反应。

氨基活性荧光染料：

羰基活性染料：

炔烃活性染料：

更多活性染料选择请参见下图：

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